Se realizará una mezcla sobre un portaobjetos atemperado a 37ºC de una pequeña gota de semen y de la misma cantidad de la tinción de eosina-nigrosina. Se dejara incubar la muestra durante 1 minuto a 37ºC  y se procederá a la extensión de la muestra. La extensión se debe realizar con firmeza pero con cuidado ayudándonos de un portaobjetos biselado que apoyado en un ángulo de 45ºn recogerá una pequeña cantidad de la muestra por capilaridad. Cuando la zona biselada ha tomado una pequeña cantidad de muestra de forma homogénea deslizaremos el portaobjetos biselado hacia el final dando lugar a la extensión de la muestra.

Nota: Sería mejor que el color de la muestra fuera morado ennegrecido (el color del Hancock)